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丝瓜草莓向日葵视频APP黄安卓色谱柱的清洗与存放

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作者:向日葵污APP下载 来源:液相售后 2025-10-10 09:55:31

丝瓜草莓向日葵视频APP黄安卓根据固定相的不同,主要分为液 - 液色谱(LLC)和液 - 固色谱(LSC)两类。现在常用的液相色谱系统,一般都包含高压输液泵、进样装置、温度控制系统、色谱柱、检测器和信号记录系统这些关键部件。和传统的液相柱色谱设备比起来,它在分析速度、分离效率和检测灵敏度上都有明显优势,能帮实验人员更高效地完成分析工作。

在液相色谱分析里,色谱柱的日常清洗和正确存放特别关键,直接关系到它的性能能不能稳定发挥,所以这两个环节一定要做好。


一、丝瓜草莓向日葵视频APP黄安卓色谱柱的清洗

每次做完样品分析,都得及时清洗色谱柱,不然样品残留或者杂质堆在柱里,时间久了会影响柱子性能。具体怎么洗,要根据用的色谱模式和流动相的成分来定,不能一概而论。

1. 不同色谱模式的清洗方法

反相色谱柱:做反相色谱分析时,极性大的组分先流出来,柱里容易留下极性小的物质。这时候就得用洗脱能力强的溶剂冲洗,像 100% 甲醇、异丙醇或者四氢呋喃(C₄H₈O)都可以,通常用相当于柱体积 20 倍左右的溶剂洗一遍,就能把残留物质冲干净。

含缓冲盐流动相的清洗:要是分析时用了缓冲盐当流动相,换有机溶剂之前,必须先用蒸馏水把色谱柱彻底冲干净 —— 这一步可不能省,一旦跳过,盐分结晶很可能堵住柱体或者系统流路,后续疏通会特别麻烦。冲完蒸馏水,再用合适的溶剂接着清洗就行。

凝胶柱:凝胶过滤色谱法用的凝胶柱,流动相大多是缓冲溶液。每次用完后,好马上用蒸馏水冲干净;如果要连续使用且计划让色谱柱过夜放置,可以在柱里留着缓冲溶液,但得保持较低的流速运行,防止盐分析出来。这里要特别注意,要是流动相里有卤化物这类有腐蚀性的成分,就算只放一夜,也必须用蒸馏水把色谱柱彻底冲干净,避免柱子和系统被腐蚀。


不同色谱模式的清洗方法对比​

表 1.不同色谱模式的清洗方法对比​


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清洗常见问题及解决办法

问题 1:清洗后柱压依然偏高

这大多是因为柱内残留了难洗脱的杂质,或者有微小颗粒堵塞了柱床。可以尝试提高洗脱溶剂的强度(比如反相柱可将甲醇换成异丙醇),延长冲洗时间,或者用低流速(0.2-0.3mL/min)冲洗 30-60 分钟,让溶剂充分接触残留杂质;如果是颗粒堵塞,可先断开检测器,用过滤后的溶剂反向冲洗色谱柱(需确认柱子是否允许反向冲洗,参考说明书),帮助冲出颗粒。

问题 2:清洗后色谱峰形变宽、分离度下降

可能是清洗时溶剂切换太突然,导致固定相收缩或受损。比如从高水相直接换成纯有机溶剂,反相柱的固定相容易因脱水收缩。解决办法是下次清洗时,逐步提高有机溶剂的比例(每次增加 10%-20%),让固定相有适应过程;如果峰形变化明显,可尝试用低浓度的流动相(如 5% 甲醇水溶液)低流速冲洗,让固定相慢慢恢复状态。

问题 3:缓冲盐残留导致柱内出现白色结晶

这是没彻底冲洗盐分就换有机溶剂的典型问题。一旦出现结晶,先断开检测器,用蒸馏水以低流速(0.1-0.2mL/min)缓慢冲洗,让结晶逐渐溶解(不可用高流速,避免结晶划伤柱床),冲洗时间根据结晶量调整,通常需要 1-2 小时,直到柱压恢复正常,再按常规步骤清洗。


二、丝瓜草莓向日葵视频APP黄安卓色谱柱的存放

色谱柱暂时不用的时候,存放条件好不好,会直接影响它的使用寿命和性能稳定性,所以存放环节也不能马虎。

1. 不同时长的存放方法

短期存放(数天内)

日常清洗完色谱柱后,把柱子两端用专用的密封堵头拧紧 —— 堵头一定要选配套的,不然密封不严会让空气进去,还会导致溶剂挥发。之后放在常温、干净的环境里就行,不用额外做复杂操作,注意别放在靠近热源或阳光直射的地方。

长期存放(数周以上)

要是存放时间超过几周,只简单密封可不够,没法保证柱效。这时候得按照色谱柱说明书上的推荐,选合适的保存溶剂把柱体充满:

反相色谱柱:一般推荐用甲醇当保存溶剂,甲醇能很好地保持固定相的湿润状态,还能抑制微生物生长;

正相色谱柱:可以选正己烷或者庚烷这类有机溶剂,避免固定相吸潮;

凝胶色谱柱:可不能直接用水保存,不然容易滋生微生物,影响柱效。建议先用 0.05% 叠氮化钠(NaNs)水溶液冲洗,再密封保存,叠氮化钠能有效抑制微生物繁殖,但使用时要注意防护,避免接触皮肤。

不管是哪种色谱柱,长期存放前都得确保柱里充满对应的保存溶剂,而且两端要严格密封。要是溶剂挥发了,固定相可能会干涸、收缩,到时候柱效会大幅下降,甚至柱子会直接损坏,就得不偿失了。


表 2.不同时长的色谱柱存放方法对比


存放常见问题及解决办法

问题 1:短期存放后,柱子内出现气泡

大多是密封堵头没拧紧,空气进入柱内导致的。可以先将色谱柱连接到系统,用保存溶剂(如反相柱用甲醇)以低流速(0.2-0.3mL/min)冲洗,让气泡随溶剂排出,冲洗 10-15 分钟后,断开柱子,重新拧紧堵头即可;下次存放前,记得检查堵头是否完好,拧紧时力度适中,避免过度用力损坏柱端。

问题 2:长期存放后,凝胶柱内出现絮状物(微生物滋生)

这是因为保存时没使用含抑菌剂的溶剂,或者溶剂浓度不够。先丢弃柱内原有溶剂,用蒸馏水冲洗柱子 1 小时,再用 0.1% 叠氮化钠水溶液以低流速冲洗 30 分钟,彻底杀灭微生物,之后换成新鲜的 0.05% 叠氮化钠水溶液充满柱体,重新密封存放;如果絮状物较多,柱子性能可能已受损,可通过进样标准品测试柱效,若柱效下降超过 30%,可能需要更换柱子。

问题 3:长期存放后,正相柱分离度明显下降

可能是存放环境湿度太大,固定相吸潮导致的。先将柱子连接系统,用正己烷 - 异丙醇混合溶剂(95:5)低流速冲洗 30 分钟,去除柱内潮气,再换成纯正己烷充满柱体,重新密封后放在干燥环境(可放少量干燥剂)中存放;下次存放时,建议将正相柱放在密封的干燥器里,避免吸潮。

总的来说,按照规范的流程清洗和保存色谱柱,不仅能让柱子用得更久,还能保证分析结果的重复性和准确性,这在液相色谱实验的质量管理中可是很重要的一环。


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